本发明属于对人体各部的人造代用品或替代物，具体涉及一种人工皮肤的制备方法，它包括人骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定，人工胶原膜的制备和细胞的三维培养；骨髓间充质干细胞来源于人骨髓，人工胶原膜来源于牛皮肤或跟腱提纯的胶原。本发明方法制备的人工皮肤，弹性和柔韧性好，可象天然皮肤一样剪切，缝合，收缩率低，抗感染能力高。具备皮肤缺损治疗的应用前景。